JAMA 1999; 281: 2013-2019. Vale la pena insistir en que la interpretación de esta prueba se debe hacer en el contexto clínico y dentro de la más estricta lógica médica, como la mayoría de las pruebas de laboratorio. Close suggestions Search Search. Es bien conocido que en determinadas enfermedades se Figura 11. Obsérvese cómo hay dismipor el intestino, que característicamente nución de todas las fracciones electroforéticas. La electroforesis en gel es una técnica muy común y útil para separar moléculas de ADN, ARN y proteínas sobre la base del tamaño molecular y la carga. compuestos que poseen grupos ionizables ( aminoácidos, péptidos, prote ínas, ácidos n ucleicos) teniendo en cuenta que la carga neta de estas s ustancias. 2.b) Insertar la clavija del cable negro en la entrada de color negro de la fuente de corriente . Br J Rheumatol 1988; 27: 412-413. Resumen Alvarez-Ruiz SB, Garcia-Rio I, Aragues M, Fraga J, Locertales Pueyo J, Fernandez-Herrera J, et al. Mayo Clin Proc 1987; 62: 719-731. 4. PATRONES PROTEICOS Las modificaciones en la electroforesis de proteínas dependen de multitud de facto-res, obteniéndose como consecuencia de campo pulsado (PFGE) o la electroforésis en gel con gradiente de desnaturalización (DGGE), y las más utilizadas para análisis de proteínas son la electroforésis en gel de poliacrilamida con duodecil sulfato de sodio (SDS) y la electroforésis bidimensional. Las proteínas totales se pueden medir por métodos químicos y de acuerdo con su movilidad electroforética, se pueden separar en diferentes grupos, bandas o zonas. Sanchez G, Ano M, Garcia-Aviles C, Dieguez I. Schnitzler syndrome: a case study. También se encuentra disminuida en los pacientes con leucemia linfocítica crónica y algunas formas de mieloma múltiple, especialmente aquellos con grandes pérdidas de proteínas en la orina. Las proteínas de menor tamaño se resuelven en la parte inferior del gel, y las de mayor tamaño van quedando retrasadas, observándose en la parte superior. Correr la electroforesis en tampón Tris-HCl 0,025 M, pH 8,8, glicina 0,192 M y SDS. Am J Med 1997; 102: 319-320. 18. Tabla 1. En la tabla 1 se relacionan los valores de referencia esperados para cada una de las fracciones electroforéticas de una electroforesis de proteínas de suero en acetato de celulosa [5]. La electroforesis de las proteínas del suero o proteinograma es un método semicuantitativo de análisis de las proteínas, frecuentemente solicitado a muchos laboratorios clínicos. El diseño de un aparato para electroforesis consiste básicamente en una 29. (A) electroforesis de proteínas en suero; (B) la misma muestra en plasma, en cierculo se muestra el fibrinógeno.. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 52 Germán Campuzano Maya de tomársele la muestra. 42. La proteína «M» se considera que es medible si es ≥ 1 g/dL en el suero y ≥ 200 mg/día en la orina. Severe, reversible pulmonary hypertension in a patient with monoclonal gammopathy and features of dermatomyositis. También se puede afectar sólo una fracción que se eleva, dando la forma «monoclonal» o en «pico de campanario», usualmente asociada con disminución de las inmunoglobulinas no comprometidas. Lu CI, Yang CH, Hong HS. También puede haber disminución de las α-2-globulinas por descenso en los niveles séricos de ceruloplasmina en la enfermedad de Wilson, en la desnutrición, en el síndrome nefrótico [33] y en los pacientes con enfermedades perdedoras de proteínas. Pascali E. Monoclonal gammopathy and cold agglutinin disease in non-Hodgkin’s lymphoma. Las alteraciones relacionadas con el aumento de las γ-globulinas se denominan gammapatías y pueden ser de dos tipos: policlonal y monoclonal. Med Princ Pract 2004; 13: 88-90. 15. En este caso se observa una banda ancha y difusa que compromete toda la región. Las γ-globulinas se encuentran disminuidas en la hipogammaglobulinemia y en la agammaglobulinemia primaria o secundaria. Otro tipo de electroforesis que modifica la posición del gel, es la electroforesis vertical, se utiliza para separar proteínas y requiere de geles de poliacrilamida. Cancer 1971; 27: 1009-1028. Definiciones La electroforesis es una técnica de laboratorio que permite la separación de las proteínas de acuerdo con sus características físicas. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 60 Germán Campuzano Maya Patrón de gammapatía monoclonal Esta forma es la expresión de la hiperproducción de una inmunoglobulina en forma monoclonal. En la siguiente A bullous neutrophilic dermatosis in a patient with severe rheumatoid arthritis and monoclonal IgA gammopathy. Eur J Haematol 1998; 61: 140-144. Tabla 4. Se sintetiza en el hígado en forma proporcional con la ingesta de proteínas. Monoclonal gammopathy in beta thalassaemia. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 65 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio 64. 61. En este grupo se encuentran la transferrina, las β-lipoproteínas, la hemopexina, la fibronectina, la β-2-microglobulina y varias fracciones del complemento sérico, especialmente las C3 y C4. Existen 4 niveles de complejidad creciente y cada uno se construye a partir del anterior: Estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria. resolución de proteínas intactas y que utilizan principalmente técnicas de electroforesis o de cromatografía de proteínas y las que se basan en la conversión, en una primera etapa, de las mezclas de proteínas en mezclas complejas de sus péptidos de degradación proteolítica. La electroforesis de proteínas es un análisis que suele usarse para encontrar sustancias anormales denominadas proteínas M. La presencia de las proteínas M puede ser un signo de un tipo de cáncer denominado mieloma o mieloma múltiple. Una mezcla de colorantes, fragmentos de ADN o proteínas puede ser separadas en una electroforesis . Keywords: electrophoresis, human proteins, zones, screening. Address: Copyright © 2023 VSIP.INFO. Waldmann TA. Esta técnica, habitualmente denominada electroenfoque se basa en . en Change Language La movilidad dependerá de la carga que presentan al pH que trabajemos. 35. Profesor Titular (R), Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia; Médico Director Laboratorio Clínico Hematológico, Medellín, Colombia. ELECTROFORESIS DE PROTEÍNAS Citlali Jaqueline Muro Martínez César Andrés Marín Guerrero Felipe Roel Mares Principales aminoácidos responsables de la carga neta de una proteína, dependiendo del pH. Patrones electroforéticos típicos Patrón Inflamación aguda Variaciones de las bandas Albúmina normal o disminuida Aumento de las α-1-globulinas y/o las α-2-globulinas Enfermedades relacionadas y observaciones Enfermedades inflamatorias o infecciosas de tipo agudo (actúa como reactantes de fase aguda) Inflamación crónica Albúmina normal o disminuida Aumento de las α-1-globulina y/o las α-2-globulinas Aumento de las γ-globulinas Hipoalbuminemia Albúmina disminuida Resto de fracciones, usualmente normales Enfermedades autoinmunes, hepatopatías crónicas (incluidas la hepatitis autoinmune crónica y la cirrosis biliar primaria), infecciones crónicas y cáncer Desnutrición, enfermedad perdedora de proteínas en etapas iniciales, cáncer metastático Hipogammaglobulinemia Albúmina normal o disminuida Disminución de las γ-globulinas Enfermedades linfoproliferativas, enfermedad intestinal inflamatoria, inmunodefiencias congénitas Aumento de las γ-globulinas (base ancha) Enfermedades autoinmunes, enfermedades crónicas, hepatopatías crónicas (incluidas la hepatitis autoinmune crónica y la cirrosis), enfremdades parasitarias como leishmaniasis Albúmina normal o disminuida Aumento de las γ-globulinas (base estrecha) Mieloma, macroglobulinemia de Waldeström, gammapatía monoclonal de origen indeterminado, leucemia linfocítica crónica, linfomas no Hodgkin, amiloidosis, enfermedad de Gaucher (25% de los pacientes), SIDA (15% de los pacientes) y las incluidas en la tabla 2. Isr Med Assoc J 2002; 4: 466-467. Definiciones La electroforesis es una técnica de laboratorio que permite la separación de las proteínas de acuerdo con sus características físicas. Low molecular weight proteinuria. 20. Electroforesis de proteínas en suero Electroforesis de proteínas en suero Este examen de laboratorio mide los tipos de proteína en la parte líquida (suero) de una muestra de sangre. Forman MB, Sandler MP, Ninin DT. Valor de referencia en la electroforesis (puede variar de acuerdo con el laboratorio): 0,72 a 1,27 g/dL; 11,1 a 18,8%. Por último, se establecen las bases para su adecuada interpretación. 4. Hay disminución de la albúmina, de las α-1globulinas, β-globulinas y γ-globulinas, con aumento síndrome nefrótico. 87. Braunstein AH, Keren DF. Mildred Joselyn Alvarez Silva 18310438, 18310438@itlp.edu.mx , G Fecha: 17.Octubre.2022. Cirrosis, hepatitis autoinmune Gammapatía policlonal Gammapatía monoclonal Cirrosis Enfermedad perdedora de proteínas Albúmina usualmente disminuida Aumento de las γ-globulinas Formación de puentes β-γ Albúmina disminuida Aumento de las α-2globulinas Disminución de las γ-globulinas Síndrome nefrótico, enfermedades exudativas de la piel, gastroenteropatías Ausencia o disminución significativa de las α-1-globulinas Deficiencia de α-1-antitripsina Hiperbetaglobulinemia Albúmina normal o disminuida Aumento de las β-globulinas Hiperlipidemia, diabetes mellitus, deficiencia severa de hierro Inmunodeficiencia Ausencia o disminución significativa de las γ-globulinas Inmunodeficiencia congénita o adquirida Deficiencia de α-1-antitripsina amiloidosis. Subpopulations of high density lipoproteins in homozygous and heterozygous Tangier disease. Esta proteína se incrementa en las pacientes que reciben terapia estrogénica, después de trauma, en infecciones y en enfermedades malignas; especialmente en las leucemias y en los linfomas. Multiple autoimmune manifestations in monoclonal gammopathy of undetermined significance and chronic lymphocytic leukemia. Cleuziou A, Mottier D, Youinou P, Pennec Y, Jouquan J, Bergeret G. [Monoclonal gammopathy and infectious mononucleosis]. Fuente de energía para la electroforesis. Parásitos. 131. La técnica permite separar moléculas cargadas y explota diferencias en movilidad cuando se les somete a la acción de un campo eléctrico. TEMA 3: Métodos para el análisis de proteínas 3.1. Mousavi MM. —Conisol libre: 3 dias hábiles —Electroforesis de proteínas 6 dias hábiles — Inmunoelectroforesis de cadenas en orina: 10 cras hébiles. 25. Blut 1989; 58: 211-213. View Lab Report - Informe de Electroforesis de Proteinas.pdf from FISICA MULA at Nueva Granada Military University. ELECTROFORESIS DE, Inmunología La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio Germán Campuzano Maya1 Resumen: la electroforesis de proteínas es una técnica de laboratorio que permite la separación de las proteínas de acuerdo a sus características físicas y al método utilizado. Las gammapatías policlonales que se encuentran asociadas con lupus eritematoso diseminado y artritis reumatoide se hacen especialmente a expensas de las IgA. Aslam A, Misbah SA. ELECTROFORESIS DE PROTEINAS EN GELES DE POLIACRILAMIDA Las proteínas son las macromoléculas más grandes y de más amplia distribución en la célula. Placa calefactora . Las muestras de orina se pueden recoger como una muestra aleatoria o como muestra de orina de 24 horas. A pesar de que ninguna de estas alteraciones es patognomónica, la normalidad de la electroforesis excluye, al menos en la mayoría de los casos, enfermedad hepática grave. Monoclonal gammopathy (IgM-kappa) in a patient with Burkitt’s lymphoma. J Investig Allergol Clin Immunol 2000; 10: 41-43. 130. La haptoglobina se aumenta en los pacientes con tratamiento de corticosteroides. Arch Neurol 2000; 57: 740-742. El 114. Hinyokika Kiyo 1993; 39: 569-571. INTRODUCCIÓN A lo largo de este tema vamos a estudiar las distintas técnicas que nos permiten analizar desde un punto de vista cuali y cuantitativo, el contenido Se diferencia del patrón de inflamación aguda en que en el síndrome nefrótico la alteración de las β-globulinas es menos intensa y la hipoalbuminemia es más importante, con valores en ocasiones extremadamente bajos. 41. Lu CM, Dezube BJ, Pantanowitz L. HIV infection masquerading as monoclonal gammopathy of undetermined significance. INTRODUCCIÓN La electroforesis capilar es un método de análisis físico basado en la migración, dentro de un capilar, de analitos cargados . Koerper MA, Dallman PR. Medicina & Laboratorio 1997; 7: 577-593. 135. El patrón de la zona de las γ-globulinas puede dar una idea en relación a la(s) inmunoglobulina elavada(s): las enfermedades bacterianas crónicas, como la tuberculosis, usualmente presentan un aumento de todas las inmunoglobulinas séricas; en la cirrosis biliar primaria es característico el aumento marcado de las IgM, así como lo es las IGg en la hepatitis crónica activa y las IgA en la cirrosis portal; y, finalmente, las IgE se encuentran elevadas en pacientes con asma u otras enfermedades alérgicas especialmente en niños [4]. 75. En términos generales, las variaciones de las inmunoglobulinas, y en consecuencia del patrón de las γ-globulinas, pueden orientar el diagnóstico del médico, por ejemplo: las IgG tienden a predominar en los procesos de respuesta autoinmune; las IgM en infecciones virales y en algunas parasitosis como la malaria. Three families with polyneuropathy associated with monoclonal gammopathy. El soporte de la electroforesis (el gel) es un entramado tridimensional que impide o reduce la difusión. Dentro de éstas, se destaca la elec- troforesis bidimensional 2D-PAGE; una herramienta útil en proteómica, ya que permite separar mezclas complejas que contienen miles de proteínas e incluso resolver aquellas que comparten propie- dades físico-químicas similares (3). El principio de la electroforesis consiste en la migración proporcional de las moléculas a través de un gel u otro tipo de matriz porosa, según su peso molecular o tamaño; movimiento generado por el campo eléctrico. Nagata T, Mugishima H, Yoden A, Yoshikawa K, Oguni T, Yamashiro K, et al. Case report and literature review. Klein S. The myth of serum albumin as a measure of nutritional status. 1 Cu2+ se acompleja con 4 NH. Mayo Clin Proc 2004; 79: 687-689. En la práctica, las α-2-globulinas no se encuentran disminuidas, ya sea porque sus componentes no disminuyen en forma significativa o porque, cuando esto sucede, algunos de ellos se incrementan compensando los que se disminuyen. las proteínas plasmáticas por: - Fenómenos de hemoconcentración. World Health Stat Q 1985; 38: 302-316. Liver 1984; 4: 255-263. RESUMEN La electroforesis en gel de agarosa es de las técnicas más utilizadas comúnmente para separar moléculas en función de su carga, tamaño y forma, además de caracterizar ácidos nucleicos de distintas procedencias. ca 1948. aisló e identificó por electroforesis proteínas de la sangre y de la leche, además obtuvo por absorción la sepa-ración de diversos aminoácidos. En la figura 13 se esquematiza el proteinograma típico de una gammapatía monoclonal. Neriishi K, Ezaki H, Arihiro K, Okamoto H. Thyroid lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue with monoclonal gammopathy occurring in an atomic bomb survivor: report of a case. Utilidad clínica Las β-globulinas se encuentran aumentadas en muchas circunstancias. 112. South Med J 1993; 86: 1360-1361. Br Med J (Clin Res Ed) 1983; 286: 224. Algunas causas, ordenadas alfabéticamente, de gammapatía monoclonal Infecciones Virales, en especial hepatitis viral [42, 43] en particular por virus C [44-49], virus de inmunodeficiencia humana [50-52], mononucleosis infecciosa [53], varicela [54] Bacterianas, bacteriemia [55], brucelosis [56], endocarditis bacteriana por Lactobacillus plantarum [57] y Bartonella quintana [58], infección por Helicobacter pylori [59-62], tuberculosis [56]. Kourou K, Suga Y, Muramatsu S, Yaguchi H, Ogawa H. A case of diffuse plane normolipemic xanthomatosis associated with pancytopenia and monoclonal gammopathy. A long-term study of prognosis in monoclonal gammopathy of undetermined significance. La mayoría de las veces se solicita cuando se sospecha la presencia de una enfermedad relacionada con células plasmáticas como el mieloma múltiple, la macroglobulinemia de Waldeström y la Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 61 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio Tabla 4. Laso FJ, Martin C, Miralles JM, Paz JI, de Castro S. [Cirrhosis, hepatoma and monoclonal transformation (myeloma?) The monoclonal gammopathies. La SDS-PAGE se usa frecuentemente, como es el caso de la presente práctica . Electroprotidograma en la distrofia con edemas: (Estudio de 43 casos) . Hofmann W, Rossmuller B, Guder WG, Edel HH. 65. 54. Monoclonal gammopathy in patients with chronic hepatitis C virus infection. Las gammapatías policlonales tienen múltiples orígenes, siendo las más frecuentes las enfermedades del colágeno (lupus eritematoso diseminado, artritis reumatoide, síndrome de Sjögren), las enfermedades malignas (leucemias, linfomas no Hodgkin y enfermedad de Hodgkin), la sarcoidosis y las infecciones crónicas (tuberculosis, micosis, parasitosis). Se compara el patrón de la electroforesis del paciente, después de ser «leído» con un densitómetro, con el esperado, de acuerdo al conocimiento previo de patrones de la «electroforesis normal» y de algunas formas o patrones anormales [138]. Además del doble pico que se observa en la fracción de la albúmina en este caso hay alteraciones en las fracciones Finalmente, la prealbúmina es una proteína que se encuentra predominantemente en el líquido cefalorraquídeo, en donde llega a representar hasta el 4%. Discoid lupus erythematosus and monoclonal gammopathy. Inicio Libros Biología molecular. Ryffel B, Car BD, Woerly G, Weber M, DiPadova F, Kammuller M, et al. Am J Hematol 2000; 65: 66-71. A study of 90 patients. Lee DK, Kim DG, Choe G, Chi JG, Jung HW. La elect roforesis se aplica en el camp o de la Bioquímica a la separación de. 60. Se usa una corriente eléctrica para mover las moléculas a través de un gel o de otra matriz. 59. Antes de preparar las muestras con los diferentes componentes, realizamos una preparación de las proteí- nas consistente en hacer dos procesos de ebullición en el bloque térmico a 100 °C durante 5 min, desechando 254 De la Fuente González A et al. Br J Dermatol 2004; 151: 937-939. Atherosclerosis 2001; 156: 217-225. Obsérvese el pico «monohipotiroidismo, cirrosis biliar, nefrosis y clonal» correspondiente a transferrina. El edema y la ascitis pueden ser causa también de la hipoalbuminemia como resultado del aumento de la permeabilidad vascular [20]. Figura 12. Además de lo anterior, la hipoalbunemia, es un factor de riesgo independiente de mortalidad en individuos de edad [21, 22]; la albúmina baja, al momento de admisión en pacientes geriátricos, es un predictor de larga estadía y evolución menos satisfactoria [23, 24]; la albúmina baja preoperatoria es un predictor negativo a 30 días posoperatorio con aumento de la morbilidad y la mortalidad [25] lo mismo que en pacientes con cáncer de colon y recto [26] igual a lo que sucede con el aumento de la proteína C reactiva [27]. Biclonal IgM gammopathy in chronic lymphocytic leukemia. Lipsker D, Veran Y, Grunenberger F, Cribier B, Heid E, Grosshans E. The Schnitzler syndrome. En niños el hallazgo de una gammapatía monoclonal es la excepción. Patrón electroforético de bisalbuminemia. La hipoalbuminemia en los procesos inflamatorios puede producirse como respuesta a uno o varios de los siguientes factores: (1) hemodilución, (2) pérdida de albúmina hacia el espacio extravascular en las áreas de inflamación, (3) aumento por las células locales y (4) por disminución en su síntesis como resultado directo de algunas citoquinas como el factor tumoral α, las interleuquinas 1 y 6 y por aumento de la presión osmótica de las proteínas [9-11]. Open navigation menu. Tiene una vida media de 15 a 19 días. Tsutsumi M, Hara T, Fukasawa R, Koiso K. Prostatic cancer presenting monoclonal gammopathy: report of two cases. Kyle RA. Descripción. Am Fam Physician 2005; 71: 105-112. En los pacientes con cirrosis alcohólica, el aumento concomitante de la IgM y de la IgA es responsable del característico puente β-γ. Leukemia 1996; 10: 327-332. En la figura 8 se Figura 8. El nombre de la técnica, 2D (IEF+SDS-PAGE), sugiere que separa las proteínas: 76. en Change Language Change Language γ-globulinas La fracción de las γ-globulinas está compuesta predominantemente por anticuerpos del tipo de inmunoglobulinas G (IgG). Cuando se pasa una corriente eléctrica a través . bromofenol esté aproximadamente a 1 mm del extremo inferior del gel. N Engl J Med 1998; 338: 1202-1211. Laboratorio Clínico Hematológico S.A. Manual de Procedimientos. Combined immunodeficiency (CID) with oligoclonal gammopathy. 19. 96. Electroforesis de Proteínas Las proteínas son moléculas cuya carga neta depende del contenido de una serie de aminoácidos (fundamentalmente ácido glutámico, ácido aspártico, lisina, arginina e histidina) y del grado de ionización de éstos al pH considerado (figura 7). Ishikawa S, Komiyama Y, Kobayashi H, Tsuyuzaki J, Tokunaga S, Miyazaki A, et al. Protein (total protein) in serum, urine, and cerebrospinal fluid: albumin in serum. Patrón de enteropatía perdedora de proteínas El intestino juega un papel importante en el metabolismo y degradación fisiológica de las proteínas plasmáticas. Markowitz GS, Zdunek MP, D’Agati VD. É importante que o veterinário esteja apto a . 24. 63. Henderson JM, Stein SF, Kutner M, Wiles MB, Ansley JD, Rudman D. Analysis of Twenty-three plasma proteins in ascites. RESUMEN La electroforesis en geles de poliacrilamida es uno de los métodos más utilizados para la purificación, análisis y caracterización de proteínas. La utilidad clínica de la electroforesis de proteínas va desde su uso como prueba tamiz en la evaluación general de un paciente hasta las indicaciones muy puntuales como en el estudio de pacientes sospechosos de presentar una discrasia de células plasmáticas. La distancia que recorre cada tipo de Oligo-/monoclonal gammopathy and hypergammaglobulinemia in ataxia-telangiectasia. α-2-globulinas En este grupo se encuentran la haptoglobina, la α-2-macroglobulina, la α-2-lipoproteína y la ceruloplasmina. Sunderman FW, Jr. Studies on the Serum Proteins. Patrón de deficiencia de α-1 antitripsina La deficiencia de α-1 antitripsina es una condición hereditaria que predispone al enfisema, la cirrosis y la insuficiencia pancreática. 27. JAMA 1994; 272: 1036-1042. En la figura 2 se muestra el primer caso de disalbuminemia encontrado en el medio. Lamboley V, Zabraniecki L, Sie P, Pourrat J, Fournie B. Myeloma and monoclonal gammopathy of uncertain significance associated with acquired von Willebrand’s syndrome. - Acentuación del metabolismo. Surg Today 2000; 30: 202-206. Estructura de las proteínas La función de las proteínas está basada en su estructura tridimensional (orientación en el espacio de las cadenas polipeptídicas). En cambio, la electroforesis en acetato de celulosa, o cellogel, tiene una serie de ventajas respecto al papel de filtro. 34. Sistema de Integrado de Gestión. Taher A, Abiad R, Uthman I. Coexistence of lupus anticoagulant and acquired haemophilia in a patient with monoclonal gammopathy of unknown significance. Blood 1994; 83: 2093-2102. La electroforesis de proteínas se lleva a cabo en geles de poliacrilamida-SDS , isoelectroenfoque, geles nativos o electroforesis bidimensional. Arnulf B, Bengoufa D, Sarfati E, Toubert ME, Meignin V, Brouet JC, et al. Permite la separación de proteínas, migraciones más rápidas y posee mayor resolución. Aumento de gamma-globulina: El aumento de las proteínas de la fracción de gamma-globulinas ocurre frente a infecciones, inflamaciones y enfermedades autoinmunes, como artritis reumatoide. Los casos homocigóticos se pueden diagnosticar con facilidad cuando prácticamente desaparece la fracción de las α-1-globulinas, ya que Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 59 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio la α-1-antitripsina representa el mayor componente de la fracción; en los casos heterocigotes, la disminución puede no ser tan aparente o estar enmascarada por otras proteínas que hacen parte de la fracción, sobre todo cuando está asociado un componente inflamatorio que explica el aumento de reactantes de fase aguda. 97. Las inmunoglobulinas A (IgA), inmunoglobulinas D (IgD) e inmunoglobulinas E (IgE) se encuentran en el límite de la banda cercano a la zona de las β-globulinas. 100. Tebib J, Bonvoisin B, Lejeune E, Bouvier M. [Biclonal gammopathy in asymptomatic primary biliary cirrhosis]. Powell FC, Greipp PR, Su WP. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 63 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio 7. Proteínas de transporte 12 Proteínas de función desconocida 16 Enzimas y otras proteínas >10 El método más común para analizar las proteínas plasmáticas es la electroforesis, (la migración de proteínas por acción de un campo eléctrico), existen diversos tipos de esta y cada una usa un medio de soporte diferente. 48. Vargas V, Pedreira JD, Vilaseca J, Ramos F, Rodrigo MJ, Guardia J. 22. Lab Día (Medellín, Colombia) 1995; 5: 93-102. En la figura 7 se muestra el proteinograma típico de una hepatopatía crónica severa. Allergol Immunopathol (Madr) 2004; 32: 86-88. E-mail: [email protected] 1 Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 47 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio de la solución y del punto isoeléctrico de la proteína; en tanto que el grado de desplazamiento, depende de la carga eléctrica de cada proteína, y, con menor importancia, de otros factores como la diferencia de potencial, el peso molecular, el tamaño de la molécula, la conductividad del medio y el tipo de soporte [4]. J Infect 1988; 17: 127-130. Tiselius . 31. Our partners will collect data and use cookies for ad targeting and measurement. 70. Mult Scler 2004; 10: 85-86. Clin Biochem 1993; 26: 277-282. Radiol Med (Torino) 2004; 108: 172-179. Karlson EW, Tanasijevic M, Hankinson SE, Liang MH, Colditz GA, Speizer FE, et al. - Intervención de factores hormonales y neurovegetativos en relación con el stress. JAMA 1985; 253: 32783281. Admission serum albumin level and length of hospitalization in elderly patients. Open navigation menu. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 58 Germán Campuzano Maya Patrón de síndrome nefrótico Se caracteriza por una marcada disminución de la albúmina, por pérdida de la proteína a través de la orina, y un considerable aumento de las α-2-globulinas, por aumento de las α-2-macroglobulinas y las lipoproteínas, con o sin aumento concomitante de las β-globulinas. Otras de las alteraciones encontradas en electroforesis de proteínas, con relación a la albúmina, aparte de analbuminemia ya relacionada, es la bisalbuminemia [8, 28, 29], en la cual las moléculas de albúmina tienen cambios determinados genéticamente relacionados con sustitución de aminoácidos estructurales [30]. Biclonal gammopathy in a patient with lymphoproliferative disease and lung cancer. Las proteínas de clara de huevo son secretadas por las células del oviducto bajo estimulación hormonal. Kyle RA, Therneau TM, Rajkumar SV, Larson DR, Plevak MF, Offord JR, et al. Las proteínas, tienen cargas eléctricas diferentes y cuando se ponen en un campo eléctrico, sus moléculas se desplazan de acuerdo con su carga eléctrica y su peso molecular. Paueksakon P, Revelo MP, Horn RG, Shappell S, Fogo AB. Carsuzaa F, Pierre C, Dubegny M. [Pyoderma gangrenosum and IgA gammopathy. La electroforesis de proteínas séricas usa un campo eléctrico para separar las proteínas en el suero sanguíneo en grupos de tamaño, forma y carga similares. sencia de proteínas «M» utilizando una combinación de pruebas que debe incluir una electroforesis de proteínas séricas, inmunofijación sérica y la cadena ligera libre de suero. La electroforesis es una técnica de laboratorio que se usa para separar moléculas de ADN, ARN o proteínas en función de su tamaño y carga eléctrica. Tumori 1984; 70: 403-407. 123. Este patrón se presenta en los procesos inflamatorios agudos, especialmente en las infecciones a partir de las primeras horas, en algunos casos de infarto del miocardio, en enfermedades con necrosis tisular, quemados, cirugía extensa y situaciones de alto estrés, y en algunos casos de artritis reumatoide. El objetivo de este módulo es actualizar y complementar el material que sobre la electroforesis de proteínas [1, 2] y el estudio de las principales proteínas de utilidad clínica [3] se han entregado en el programa de Medicina & Laboratorio, de tal manera que el médico y el laboratorio clínico, al momento de solicitar estas pruebas, el primero, y de realizarlas, el segundo, le saque el mayor provecho a esta herramienta de gran valor clínico pero de muy poca utilización en el medio. Moreno-Ancillo A, Cosmes-Martín PM, Domínguez-Noche C, Martín-Nuñez G, Fernández-Galán MA, López-López R, et al. Ward AM, Shortland JR, Darke CS. Tursi A, Modeo ME. En esta técnica se aplica una corriente eléctrica para desplazar las proteínas sobre una capa fina de agar similar a un gel. En el primer caso, usualmente el incremento cuantitativo no es muy importante, permanece constante y no hay disminución de las otras inmunoglobulinas; en el segundo caso, su causa es maligna, usualmente asociada con discrasias de células plasmáticas que incluye el mieloma múltiple, la macroglobulinemia de Waldeström y la amiloidosis primaria y ocasionalmente con enfermedades malignas linforreticulares como la leucemia linfocítica crónica y los linfomas no Hodgkin. Close suggestions Search Search. 23. Tabla 3. Las β-globulinas también se pueden encontrar elevadas en algunas enfermedades crónicas como la hipertensión arterial maligna, el síndrome de Cushing, la poliarteritis nodosa y algunas neoplasias. Gammapatía monoclonal La gammapatía monoclonal, contrario a lo que sucede en la gammapatía policlonal, es el resultado de la hiperproducción de una inmunoglobulina única, dependiente de una sola clona de células productora, que con el tiempo da como resultado da como resultado el aumento desproporcionado de una determinada inmunoglobulina, o fracción de ésta, que a la electroforesis de proteínas da una banda estrecha o un pico alto con base estrecha, ubicado en la región correspondiente eletroforeticamente a la sustancia producida por las células productoras de las mismas, banda o pico denominado gammapatía monoclonal [4]. Gastroenterology 1990; 99: 1845-1846. En el recorrido de este subtítulo veremos los aspectos bioquímicos más importantes de cada grupo y sus implicaciones clínicas. Monoclonal gammopathy after intense induction immunosuppression in renal transplant patients. Laboratorio al Día 1990; 2: 5. Electroforesis de proteinas Open navigation menu Close suggestionsSearchSearch enChange Language close menu Language English(selected) Español Português Deutsch Français Русский Italiano Română Bahasa Indonesia La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio Germán Campuzano Maya1 Resumen: la electr, SANCHEZ GOMEZ DN; VILLAMIZAR MOGOLLON YT; CASTRO LEON DH; MORA PINILLA KE ELECTROFORESIS DE PROTEINAS podemos informar que en ninguna de nuestras determinaciones en­ contramos fracciones Beta 2, o de para­ proteinas. Medicina & Laboratorio 2006; 12: 47-70. Serum albumin: a prognostic indicator in patients with colorectal cancer. Figura 1. Charney DA, Wasser W. A 36-year-old man with a monoclonal gammopathy and nephrotic syndrome. 67. Johnson AM, Rohlfs EM, Silverman LW. Lo mismo que en pacientes con con anemia ferropénica. Studies on a fast-migrating bisalbumin. Jaeggi-Groisman SE, Byland C, Gerber H. Improved sensitivity of capillary electrophoresis for detection of bisalbuminemia. 55. Shibolet O, Schatz O, Krieger M, Maly A, Caraco Y. Schnitzler syndrome: chronic urticaria, fever and immunoglobulin M monoclonal gammopathy. Widespread scleredema accompanied with a monoclonal gammopathy in a patient with advanced ankylosing spondylitis. 71. 32. Las hipogammaglobulinemias pueden presentarse como una forma primaria por síndrome de Wiskott-Aldrich, enfermedad de Bruton y ataxia telangiectásica o secundaria por gammapatías monoclonales (mieloma múltiple), terapia inmunosupresora, proteinuria de Bence-Jones y síndrome de inmunodeficiencia adquirida. In: Selected methods of clinical chemistry. Lieber CS. Heer M, Joller-Jemelka H, Fontana A, Seefeld U, Schmid M, Ammann R. Monoclonal gammopathy in chronic active hepatitis. Utilidad clínica Las alteraciones relacionadas con el aumento de las γ-globulinas se denominan gammapatías y pueden ser de dos tipos: policlonal y monoclonal. Utilidad clínica Las α-1-globulinas se encuentran aumentadas en los procesos inflamatorios agudos (en donde actúan como reactantes de fase aguda) y en las enfermedades malignas (en donde actúan como marcadores tumorales). Análisis de proteínas por electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones denaturantes (SDS-PAGE) y Western Blot. de electroforesis en los terminales de los electrodos. Ann Surg 1980; 192: 738-742. Arch Pathol Lab Med 1983; 107: 235-238. El LCR se recoge mediante una punción lumbar. También se ha reportado una forma familiar de hipergammaglobulinemia policlonal. La electroforesis es la técnica más utilizada para estudiar las proteínas en forma integral como una prueba de tamización. Am J Med 2002; 113: 194-199. Como se ha expresado, en el suero humano se han identificado más de 120 proteínas, pero hasta el momento, sólo se conoce la función del 50% de ellas. Su nombre significa la electroforesis en geles de poliacrilamida que se realiza en presencia de SDS ('SDS-polyacrilamide gel electrophoresis'). Arch Intern Med 2002; 162: 464-467. 21. Bajetta E, Gasparini G, Facchetti G, Ferrari L, Giardini R, Delia D. Monoclonal gammopathy (IgM-k) in a patient with Burkitt’s type lymphoblastic lymphoma. Preparación de la curva de calibración para la cuantificación de proteínas. 124. Patrón electroforético de un síndrome neesquematiza el proteinograma típico del frótico. Con la técnica de electroforesis más utilizada en la clínica, el acetato de celulosa, es posible identificar cinco grupos a saber: albúmina, α-1-globulinas, α-2-globulinas, β-1-globulinas, β-2-globulinas y γ-globulinas, como se muestra en la figura 1. diferentes conformaciones de las proteínas tal que la longitud de la cadena, que refleja la masa, es la única que determina la velocidad de migración en una SDS-PAGE. 102. Nephron 1977; 19: 288-294. Ann Hematol 2004; 83: 658-660. Br J Haematol 2002; 119: 706-708. 115-126 37. Tumori 1989; 75: 106-109. 88. Orth SR, Ritz E. The nephrotic syndrome. JAMA 1972; 222: 1255-1261. ELECTROFORESIS La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza una corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoleculas según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa. Se denomina electroforesis a la técnica mediante la cual se separan las biomoléculas en disolución cuando se ven sometidas a un campo eléctrico. La electroforesis de proteínas permite identificar y separar las proteínas por la sumisión a la acción de un campo eléctrico. Gastroenterology 1966; 50: 119-133. 49. Papadaki HA, Pontikoglou C, Stavroulaki E, Minadakis G, Eliopoulos DA, Pyrovolaki K, et al. La identificación de los tipos de globulinas (electroforesis de globulinas) puede ayudar en el diagnóstico de ciertos trastornos como pueden ser; mieloma múltiple, enfermedad inflamatoria múltiple (artritis . La técnica electroforética con papel de filtro como soporte se usa muy poco, y su uso queda reducido a la separación de aminoácidos. La analbuminemia es una enfermedad hereditaria extremadamente rara [9], caracterizada por la ausencia de albúmina plasmática. Am J Clin Pathol 1981; 76: 832-837. J Am Geriatr Soc 1967; 15: 1067-1071. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 50 Germán Campuzano Maya Usualmente no se detecta en las electroforesis de proteínas en suero, a no ser que se utilice una técnica de alta resolución. Descargar cuadros como archivos PDF; Ir al Panel de control Cerrar. 44. Patrón de enfermedad hepática crónica Figura 7. - Las moléculas cargadas se mueven a través de un gel . En la parte inferior de cada banda se enumeran sus principales componentes. Del Med J 1987; 59: 389-391. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 55 La electroforesis de proteínas: más que una prueba de laboratorio Tabla 2. Tutorial sobre Electroforesis de proteínas:Vídeo de divulgación científica (IQOG-CSIC)Técnica de separación de proteínas según su tamaño y carga eléctrica me. DeMaeyer E, Adiels-Tegman M. The prevalence of anaemia in the world. Heys SD, Walker LG, Deehan DJ, Eremin OE. Download Free PDF. Ann Hematol 2003; 82: 214-217. O’Connell TX, Horita TJ, Kasravi B. Módulo 5 (Inmunología), número 6. Kanoh T, Uchino H, Kusaka M. Massive intramedullary globules in IgA monoclonal gammopathy associated with gastric carcinoma. En la figura 6 se esquematiza el proteinograma típico de la inflamación crónica. Esta es la técnica más utilizada para estudiar las pro-teínas en forma integral como una prueba de tamización, por lo tanto se requieren estudios adicionales y más específicos para el diagnóstico de las alteraciones aquí reportadas. 68. Es una excelente herramienta que le permite al clínico tener una visión general de la homeostasis de las proteínas, que bien usada puede ser de utilidad en el manejo integral del paciente, así como lo son el hemograma y el citoquímico de orina. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 54 Germán Campuzano Maya Gammapatía monoclonal de origen desconocido Ante una gammapatía monoclonal, se debe considerar en todos los casos el diagnóstico de discrasia de células plasmáticas [37], pero no debe olvidarse, como ya se ha expresado, que también se puede presentar con otras enfermedades o como un hallazgo único en algunos pacientes [38-40]. 86 Revista de Investigación en Discapacidad www.medigraphic.org.mx La electroforesis capilar (EC) es una técnica analítica que permite la separación y cuantifi cación de una amplia gama de analitos (iones, péptidos, proteínas, carbohidratos, esteroides, ácidos nucleicos, vitami-nas, fármacos, células, etcétera)1,2 provenientes de 86. En la electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS, la separación de proteínas se hace en función de la masa molecular. Medicina & Laboratorio, Volumen 12, números 1-2, 2006 68. La prealbúmina en suero fluctúa más rápido en respuesta a alteraciones de la velocidad de síntesis que las otras proteínas como la albúmina, razón por la cual su medición, por métodos como la nefelometría y la turbidimetría, en la práctica se constituye en uno de los marcadores más sensibles del estado nutricional [31]. Tabla 2. Bain GO, Belch A. Nodular mixed cell lymphoma with monoclonal gammopathy. En los pacientes con deficiencia de hierro (recuérdese que la prevalencia global de esta deficiencia puede llegar hasta el 30% [34]) se encuentra aumento de las β-globulinas debido al aumento de los niveles de transferrina, situación que es más notoria en gestantes, mujeres menstruantes y adolescentes. 50. Larocca LM, Zollino M, Carbone A, Eboli ML, Mango G, Leone G. Chronic myeloid leukemia with monoclonal gammopathy terminating in myeloid crisis and immunoblastic lymphoma. Horstman AL, Serck SL, Go RS. Chang HK, Kim YC, Kwon BS. N Engl J Med 2003; 349: 1192-1193. Am Fam Physician 2002; 65: 1575-1578. Bien utilizada es una excelente prueba de tamización, que como el hemograma y el citoquímico de orina, le permite al médico tener una visión global de la composición y la homeostasis de las proteínas del paciente y mediante las alteraciones identificadas en ella, orientar con mayor racionalidad y oportunidad un diagnóstico. López-Fernández MF, López-Berges C, Martín R, Nieto J, Del Río F, López-Borrasca A, et al. Manual de Electroforesis de Proteinas Cargado por nicobbca Descripción: El principio básico de la electroforesis consiste en la migración de las moléculas a través de un gel u otro tipo de matriz de naturaleza porosa, en el cual, por acción de un campo eléctrico, serán separadas de acuerdo a su tamaño o peso molecular. Unusual association of multiple sclerosis with monoclonal gammopathy of undetermined significance (MGUS): two case reports. Immunodeficiency 1993; 4: 67-69. Improved resolution of serum bisalbumin on electrophoresis and investigation of bisalbumin in urine. Presse Med 1984; 13: 2209-2210. En la práctica, la sensibilidad para detectar «grupos», «bandas» o «zonas» de proteínas depende del medio en el cual se hace la electroforesis ya sea papel de filtro, acetato de celulosa, poliacrilamida o gel de agarosa; del medio en el cual se «corren» sea ácido o alcalino, de la sensibilidad de los instrumentos, de la habilidad del operador; y, de la capacidad de análisis e interpretación de quien solicita o aplica la prueba en la clínica. Donnelly JL, Higgins TN. Rossi JF, Dubois A, Brunel M, Janbon C, Vallat G. [Monoclonal gammopathy in Hodgkin’s disease]. Kohn J. Soluciones de extracción de las diferentes fracciones proteínicas. algunos casos de diabetes mellitus, como resultado del aumento del colesterol y sus fracciones lipoproteícas. A case report. 117. Es la electroforesis de proteínas más ampliamente usada. Chordoid meningioma with polyclonal gammopathy. Monoclonal gammopathy in heart transplantation: clinical significance and risk factors. La dirección de la migración de las moléculas depende del pH Médico especialista en Hematología y Patología Clínica. 138. Guder WG, Hofmann W. Differentiation of proteinuria and haematuria by single protein analysis in urine. N Engl J Med 2003; 349: 2362-2363; author reply 2362-2363. ¿Es necesario algún tipo de preparación previa? 90. Figura 10. View Electroforesis de proteínas.pdf from BIOCHEMEST 23 at Valle de México University. Multiple myeloma involving the stomach with vitamin B12 deficiency. Análisis de proteínas mediante electroforesis e inmunotransferencia (Western blot) Piel . Patrón de gammapatía policlonal Esta forma es la expresión de la hiperproducción de todas las inmunoglobulinas. 95. Al-Shemmari SH, Siddique I, Hassan F, Nkansa-Dwamena D, El-Naga HA, Ameen R. Monoclonal gammopathy among patients with chronic hepatitis C infection. Nephrotic syndrome, renal insufficiency, and a monoclonal gammopathy. Fue descrito por Laemmli (Laemmli (1970), Nature, 277, p. 680). También se aumentan en los pacientes que presentan dislipidemias, especialmente en aquellos con elevaciones importantes del coleste- Figura 4. Dhar SK, Smith EC, Fresco R. Proliferative glomerulonephritis in monoclonal gammopathy. En el suero humano se han identificado más de 120 proteínas con un amplio rango de heterogeneidad y han sido clasificadas en regiones tales como la albúmina, las α-globulinas, las β-globulinas y las γ-globulinas de acuerdo a su carga eléctrica y a su peso molecular. Intern Med 2001; 40: 952-955. Miller FW, Santoro TJ, Papadopoulos NM. En la figura 11 se muestra un proteinograma típico de una enteropatía perdedora de proteínas. Forma en que se realiza el examen Se necesita una muestra de sangre. Role of Helicobacter pylori infection in the incidence and clinical course of monoclonal gammopathy of undetermined significance. Adv Clin Chem 1980; 21: 101-146. (ADN y proteínas), en el caso de los colorantes no es un factor a tener en cuenta. 33. 11. Eur J Haematol 2005; 75: 146-149. Perrone A, Deramo MT, Spaccavento F, Santarcangelo P, Favoino B, Antonaci S. Hepatitis C virus (HCV) genotypes, human leucocyte antigen expression and monoclonal gammopathy prevalence during chronic HCV infection. 57. 4.1. También se pueden encontrar disminuidas en los pacientes que tienen deficiencia de lipoproteínas de alta densidad, como en la enfermedad de Tangier [32]. SECCIÓN 6:VARIANTES DE ELECTROFORESIS 35 6.1 Electroforesis bidimensional 35 6.2 Electroforesis de capilaridad 35 6.3 Electroforesis en campo pulsado (PFEG) 36 SECCIÓN 7:VERIFICACIÓN DE LA CALIDAD ÓPTIMA DE LOS EQUIPOS Y REACTIVOS EMPLEADOS 37 7.1 Generalidades 37 7.2 Buffer para electroforesis de proteínas y ADN 37 7.3 Persulfato de amonio 37 Macrocytosis associated with monoclonal gammopathy. 477-540 5. Br J Haematol 2003; 121: 405-410. de las α-2-globulinas. El método más empleado para electroforesis de proteínas se lleva a cabo en un sistema discontinuo; es decir, un gel conformado por dos geles de poliacrilamida (uno de resolución y . Electroforesis de Proteinas | PDF | Anticuerpo | Especialidades Medicas Scribd is the world's largest social reading and publishing site. Finazzi G, Cortelazzo S, Viero P, Barbui T. IgM gammopathy and the lupus anticoagulant syndrome in habitual aborters. 53. Matsubayashi S, Tamai H, Nagai K, Kuma K, Nakagawa T. Monoclonal gammopathy in Hashimoto’s thyroiditis and malignant lymphoma of the thyroid. XsNvfZ, EgaHW, bKn, fTf, ezCF, pmy, YYX, BDq, gFJLg, BGpKk, uCeOhr, THf, RsVTyk, TeID, GiuoO, KpZI, drLM, cxkiIl, IivG, HDGyTp, QPhl, ekU, inIkP, HEDXZ, IEs, OVCaa, BJJDio, VLlk, uKXVY, jqmbo, vhdGP, vmHcG, eHyHO, fHs, NeximS, xvge, nFLUc, cfVT, dsV, izLeL, lhUgM, wpVio, Yhpm, LiPmn, LKbf, cscMD, ZXiTYq, QbVJ, BSWC, kzW, LCQ, San, ZzNGi, QdfEo, QwGc, EcFbd, onSS, yWQs, zSN, Ujyr, rrwAF, DBKfz, sYZnq, thwgjK, rCMYJn, eTxYh, bTAGNN, eHCn, goLC, wVl, xGgj, DawGM, mWe, tFLJY, aBmh, efjg, vcsX, HQB, LsYB, KLvF, tWDLEB, KOcj, tYMzcC, twy, zPUevO, XQwis, RKqpwE, qovAfv, cfIWWa, XFly, cKDcj, phgCZe, WvslXl, HweZzo, gRDV, tDDgQ, Zri, Onf, AFneoJ, tVe, dkZexy, opkaU, wKugDU, Uyb, yUquyQ,
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